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影响培养基灭菌效果的因素

发布时间:2019-11-05    浏览次数:92

培养基灭菌是否彻底,直接影响科研检测数据,影响培养基灭菌的因素很多,除了培养基内杂菌的种类和数量,灭菌时间长短和温度高低,还取决于以下几点

1. 营养成分的保持

湿热灭菌?#20445;?#24494;生物被杀死的同?#20445;?#22521;养基的营养成分也遭到了一定的破坏,特别是氨基酸和维生素。如在121℃,仅20min,就有59%的赖氨酸和精氨酸及其他碱性氨基酸被破坏,蛋氨酸和色氨酸也有相当数量被破坏。在热的作用下某些营养成分还可能因受热而相互之间发生反应,造成培养基?#24615;?#26377;营养成分的数量变化,因而影响培养基质量。

2. 微生物的耐热性

细菌芽孢的热阻?#27927;螅?#28781;菌所需要的时间取决于把细菌芽孢减少到所规定数目的时间。

3. pH值

pH值对微生物的耐热性影响很大。pH值介于6.0~8.0?#20445;?#24494;生物最不易死亡。pH<6.0?#20445;?#24494;生物比较容易死亡,此时PH很容?#21672;?#20837;微生物的细胞,从而改变细胞的生理反应,促使其死亡。所以培养基的pH越低,所需的时间也越短。

4. 培养基的成分

油脂、糖类及蛋?#23383;实?#32452;成的高浓度有机物会包于细胞的周围形式一层薄膜、影响热的传导。而高浓度的盐类、色素则削弱其耐热性,灭菌较易。例如:大肠杆菌在水中加热至60-65℃便死亡,在10%糖液中需70℃加热4-6分钟才死亡,在30%糖液中需30分钟才死亡。一般糖类含量较多的时候最好选用115℃,30分钟;一般的培养基可选择121℃20分钟。

5. 泡沫

泡沫中的空气形成隔热层,使热量难以渗透进去,杀死其中的杂菌,从而影响培养基灭菌效果。

6. 颗粒

颗粒小,容易灭菌,颗粒大,则难灭菌。对于含有少量?#27927;?#39063;粒?#25353;?#32420;维的培养基,可用粗滤的方法(不应影响培养基质量)予以除去,培养基结块会造成培养基灭菌的不彻底。

7. 灭菌锅内空气是否排净

这个是影响培养基灭菌是温度和压力?#22756;?#20851;系的要点,同样达到了相同的压力的情况下,如果空气未能排净,也就是说不是?#31354;?#27773;灭菌,此时的温度不一定能达到目的要求,会严重影响培养基灭菌效果

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